固相樹脂からペプチドを切断する 2 つの方法-

固相 Fmoc ペプチドを化学合成した後、切断する多くの方法があります。ここでは、誰もがよく使う基本的な 2 つのタイプを紹介します。

乾燥した樹脂をシェーカー フラスコに入れ、適切な量のスカベンジャー (スカベンジャー) 切断試薬トリフルオロ酢酸 (TFA)、10 ～ 25 ml/g 樹脂を加え、カバーし、室温で断続的に振盪します。新しい TFA で樹脂を濾過します。 樹脂を 2 ～ 3 回洗浄し、濾液を合わせて、8 ～ 10 倍量の氷エーテルを滴下します。場合によっては、その一部を蒸気で TFA から除去することもできます。粗ペプチド沈殿物が得られました。ジエチルエーテルを氷で冷却すると、沈殿効率が向上します。最後に、沈殿した粗ペプチドを回収します。

適用樹脂：キングレジンまたはリンクアミドレジン

1% TFA:

ポリペプチド-吊り下げ樹脂を1% TFAを含む溶液に加えました。ジクロロメタン溶液のガラス製振盪フラスコを密閉し、2分間振盪しました。窒素を使用して、ろ液を 10% ピリジンを含む別の新しいメタノール振盪フラスコに注ぎます。上記の操作を10回繰り返します。 30 ml DCM、30 ml MeOH を使用します。樹脂上の残りの保護ペプチドを連続して 3 回洗浄します。 TLC または HPLC で洗浄残留物を確認します。すべての濾液を合わせ、減圧下で溶媒を蒸発させて５％の体積を残す。 40 mlの水を加え、混合物を氷-で冷却して沈殿を促進した。ろ過後、きれいな水で3回洗浄し、真空乾燥ボックスに入れて使用します。 KOH または P2O5 乾燥させます。

希酢酸：

AcOH/TFE/DCM (2:2:6) を使用します。 樹脂上にぶら下がっているペプチドを切断液で 2 時間処理し、樹脂を濾過し、樹脂を切断液で 3 回洗浄します。混合濾液に 15 倍量の n- ヘキサンを加え、ロータリーエバポレーターで蒸発させて過剰の酢酸を除去します。ペプチドの回収方法については以下で詳しく説明します。

適用樹脂：2- CTC樹脂